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穩轉過表達細胞系構建
慢病毒穩定過表達是將目的基因的cDNA序列連接到不同的慢病毒載體上,通過包裝獲得過表達目的基因的慢病毒?;鼡碛?2000多個獨特的(不重復)人類ORF克隆,所有的人類ORF克隆都經過全長測序確定,基本上涵蓋了所有的已知基因。Human gene ORF可用于基因表達,基因突變體構建等研究。
載體示意圖
注:5′LTR、3′LTR 、RRE均為慢病毒的元件;U6、CMV為啟動子;2A為自剪切多肽,蛋白的高效表達,表達后自動剪切。EGFP為增強綠色熒光蛋白;Mcherry為紅色熒光蛋白;Puro為嘌呤霉素;Nanoluc-EGFP為熒光素酶和綠色熒光蛋白融合蛋白。
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