穩轉沉默細胞系構建

慢病毒（Lentivirus）是逆轉錄病毒的一種。慢病毒載體是以HIV-1（人類免疫缺陷I型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體?？捎糜诟腥疽揽總鹘y轉染試劑難于轉染的細胞系如神經細胞、肝細胞、心肌細胞、內皮細胞、干細胞、原代細胞以及懸浮細胞和處于非分裂狀態的細胞，并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組，進行長時間的穩定表達。

載體示意圖

注：5′LTR、3′LTR 、RRE均為慢病毒的元件；U6、CMV為啟動子；2A為自剪切多肽，蛋白的高效表達，表達后自動剪切。EGFP為增強綠色熒光蛋白；Mcherry為紅色熒光蛋白；Puro為嘌呤霉素；Nanoluc-EGFP為熒光素酶和綠色熒光蛋白融合蛋白。