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條件性點突變小(大)鼠
技術原理簡介
條件性點突變主要是通過Loxp2722-Loxp/Cre介導的DNA片段反轉技術,利用CRISPR技術剪切目標基因的DNA,通過DNA的同源重組修復,在目標基因特定exon后的intron上,敲入反向的帶有點突變exon。正常情況下,目標基因拼接野生型的exon, 表達野生型蛋白;當與Cre交配后,在Cre表達的細胞和組織中,反向帶有點突變exon被反轉,目標基因拼接帶有點突變的exon,并表達點突變蛋白。
基石生命自主研發的第三代基因敲除敲入系統,該系統采用受精卵注射的方式將一對Loxp2722-Loxp序列高效地插入到基因組上,較傳統的ES系統的方法提高了近2000倍。本公司最快3個月可以得到Founder!鄭重承諾,失敗全額退款!
TALEN/CRISPR構建條件性點突變小(大)鼠技術流程圖
服務流程及周期
步驟 |
說明 |
周期 |
Cas9靶點的設計與活性檢測 |
選活性高的Cas9 靶點做后續小鼠基因點突變工作。 |
4-8周 |
Donor DNA的設計與準備 |
構建并準備donor。 |
4-8周 |
顯微注射受精卵獲得founder小鼠 |
檢測founder基因型,確認發生基因點突變。 |
1.5-5個月 |
獲得到F1代雜合子 |
founder小鼠與野生型小鼠交配,獲得穩定遺傳的F1代雜合子,交貨給客戶。 |
3-4個月 |
流程對比
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