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條件性敲除小(大)鼠
技術原理簡介
條件性基因敲除主要是通過Cre/LoxP重組系統來實現的。該系統是位點特異性重組酶系統,已發展成為在體內、外進行遺傳操作的有力工具。其可以使靶基因的表達或缺失發生在試驗動物發育的某一階段或某一特定的組織器官。此外,若與控制Cre表達的其他誘導系統相結合,還可以對某一基因同時實現時空兩方面的調控。
唯尚立德公司自主研發的第三代基因敲除敲入系統,該系統采用受精卵注射的方式將一對LoxP序列高效地插入到基因組上,較傳統的ES系統的方法提高了近2000倍。本公司最快3個月可以得到Founder!鄭重承諾,失敗全額退款!
TALEN/CRISPR構建條件性敲除小(大)鼠技術流程圖
服務流程及周期
服務流程及周期圖
步驟 | 內容 | 周期 |
Cas9/gRNA的合成和同源模板(Donor)構建 | 合成Cas9/gRNA,檢測Cas9/gRNA活性,構建同源模板質粒 | 2個月 |
得到Founder | Cas9/gRNA體外轉錄成mRNA和Donor質粒共同顯微注射受精卵,胚胎移植到代孕母鼠子宮,3周后出生,2周齡基因型鑒定。 | 2-3個月 |
得到F1代雜合子 | 2個月后性成熟,Founder和野生型小鼠交配,3周后出生,2周齡基因型鑒定,獲得穩定傳代的基因突變雜合子F1代。 | 3-4個月 |
流程對比
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